Uji Cemaran Mikroba pada Air Minum : Bagian 1
Mengapa proses desinfektasi perlu dilakukan pada Air Minum? Telah dibahas pada Artikel Sebelumnya bahwa berbagai sistem diaplikasikan guna menghasilkan produk air minum yang berkualitas dan bersih dari mikroorganisme patogen, salah satunya adalah melalui reaksi ozonisasi. Analis pun perlu melakukan evaluasi terhadap cemaran mikroba pada produk jadi sehingga memenuhi standar baku mutu yang telah ditetapkan. Berdasarkan Standar Nasional Indonesia Nomor 3553 Tahun 2023 dan Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 2 Tahun 2023, terdapat 3 parameter utama yang dijadikan sebagai penentu kualitas Air Minum secara mikrobiologi yakni angka lempeng total (ALT), Koliform, dan Pseudomonas aeruginosa.
Seperti yang kita ketahui, air minum adalah elemen yang esensial untuk manusia untuk memenuhi kebutuhan cairan dan mineral dalam tubuh. Namun definisi air minum ternyata lebih luas daripada itu. Berdasarkan definisi yang dikemukakan oleh Kementerian Kesehatan, air minum adalah air yang melalui pengolahan atau tanpa pengolahan yang memenuhi syarat kesehatan dan dapat langsung diminum. Diperlukan proses yang detail untuk menghasilkan air minum yang sesuai dengan standar. Baku mutu ini diatur oleh Kementerian Kesehatan pada Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 2 Tahun 2023 tentang Peraturan Pelaksanaan Peraturan Pemerintah Nomor 66 tentang Kesehatan Lingkungan, tepatnya pada Bab 2 Lampiran. Disebutkan bahwa evaluasi pada air minum perlu dilakukan secara berkala untuk memastikan bahwa air minum yang dihasilkan telah sesuai dengan baku mutu yang berlaku dan layak dikonsumsi.
Syarat penentuan kualitas tersebut didasarkan pada hasil evaluasi pengukuran pada 4 aspek, yakni aspek fisik, kimia, mikrobiologi, dan radioaktif. Dalam aspek mikrobiologi, air minum sangat rentan untuk terkontaminasi cemaran mikroba seperti bakteri, jamur maupun virus yang dapat menyebabkan timbulnya penyakit. Bakteri yang paling sering ditemukan sebagai pencemar pada air minum adalah E.coli dan Koliform (Coliform). Menurut World Health Organizations (WHO), kedua bakteri ini berpotensi tinggi untuk menyebabkan gastroenteritis, yakni peradangan pada usus dan lambung yang menyebabkan diare, mual, muntah, dan nyeri pada perut. Disisi lain, bakteri seperti Pseudomonas aeruginosa juga dijadikan sebagai parameter referensi penentuan kualitas air minum. Adapun nilai standar dari beberapa baku mutu dapat disimak pada Tabel 1.
Tabel 1. Baku Mutu Cemaran Mikroba pada Air Minum dan Air Mineral
Metode Uji Cemaran Mikroba
Diperlihatkan pada Tabel 1 bahwa setiap sampel air minum maupun air mineral perlu dilakukan uji cemaran mikroba dengan nilai dan parameter yang berbeda - beda. Mari kita bahas lebih lanjut setiap cara ujinya berdasarkan Standar Nasional Indonesia dan International Organization for Standardization (ISO).
-
Volume air yang diperlukan untuk uji sebagai contoh setidaknya 250 mL;
-
Uji mikroba wajib dilakukan secepat mungkin dari saat pengambilan sampel. Jika transportasi sampel memakan waktu lebih dari 8 jam, maka diperlukan monitor terhadap sampel dan dicatat juga suhunya;
-
Analis wajib menggunakan air tipe III berdasarkan ISO 3969. (Klik disini untuk melihat spesifikasi air);
-
Menggunakan media yang telah disterilisasi dalam autoklaf pada suhu 121o +/- 3oC selama 15 +/- 1 menit;
-
Media pembiakkan tidak boleh disimpan lebih dari 4 jam, jika telah telah melebihi 4 jam, maka media tidak boleh digunakan, harus dibuang;
-
Pada tahap persiapan untuk inokulasi, waktu antara penambahan bahan yang diuji (atau pengencerannya) dan penambahan media cair tidak boleh lebih dari 15 menit.
Escherichia Coli didefinisikan sebagai bakteri kelompok Enterobacteriaceae yang mampu mengekspresikan enzim β-glukoronidase dan β-D-galaktosidase. Bakteri ini sebenarnya masuk ke dalam kategori bakteri Coliform. Bakteri Coliform umumnya tidak bersifat patogen. Namun dengan adanya keberadaan bakteri Coliform pada air minum memberikan tanda bahwa bakteri patogen mungkin juga masuk ke dalam suatu sumber air minum bersama dengan kontaminasi kotoran. Jenis bakteri ini bisa saja E.coli atau tipe bakteri Coliform lainnya, sehingga penelusuran lebih lanjut diperlukan untuk hal ini.
Dilansir dari Standar Nasional Indonesia Nomor 3554 Tahun 2015, uji bakteri Koliform dan Escherichia Coli dilakukan dengan prinsip penyaringan sampel yang hendak diuji dengan membran (membran filter) yang mampu menjerat mikroorganisme. Proses penyaringan ini diikuti dengan peletakkan membran penyaring tersebut pada permukaan cawan agar chromogenic coliform. Dalam ujinya, cawan petri untuk uji ini diletakkan secara terbalik dan diinkubasi pada suhu 36+/-2oC selama 21 +/- 3 jam dalam Alat Inkubator. Beberapa catatan penting diperlukan untuk melakukan uji ini, antara lain :
-
Volume air yang diperlukan untuk uji sebagai contoh setidaknya 250 mL;
-
Uji mikroba wajib dilakukan secepat mungkin dari saat pengambilan sampel. Jika transportasi sampel memakan waktu lebih dari 8 jam, maka diperlukan monitor terhadap sampel dan dicatat juga suhunya;
-
Penyaringan dilakukan pada membran yang memiliki pori berukuran 0.45 μm.
-
Jumlah total koloni yang teramati pada penyaring membran (tipikal dan atipikal) sebaiknya kurang dari 200 dengan memperhatikan besar kecilnya koloni yang terbentuk.
-
Kekuatan vakum yang digunakan berkisar 70 kPa dengan volume pembilasan membran dilakukan 1 - 3 porsi dengan volume pengencer steril 10 - 30 mL.
-
Wajib menggunakan Alat inkubator yang terkendali secara termostatik pada suhu 36+/- 2oC
-
Pengukuran pH dilakukan dengan pH Meter yang memiliki akurasi 0.1 pada suhu 20 - 25oC.
Gambar 2. Cara Peletakkan Sampel dalam Alat Inkubator
Untuk mengkonfirmasi keberadaan Coliform pada sampel, analis dapat melakukan uji oksidase. Uji ini dilakukan dengan meneteskan pereaksi oksidase keatas kertas penyaring membran pada permukaan cawan petri. Reaksi positif oksidase ditandai dengan munculnya warna biru tua dalam kisaran waktu 30 detik. Namun secara kualitatif, keberadaan Coliform dapat dipastikan dengan hasil uji oksidase yang negatif. Meskipun begitu, perhitungan koloni harus tetap dilakukan menurut ISO 8199. Laporan untuk uji Coliform (Koliform) dan Escherichia Coli ini dinyatakan dengan menghitung jumlah koloni bakteri Koliform dan E.coli, dimana :
-
Perhitungan total bakteri Coliform adalah jumlah dari seluruh koloni merah muda hingga merah yang negatif oksidase ditambah dengan koloni berwarna biru tua hingga ungu.
-
Perhitungan E.coli adalah jumlah koloni biru tua hingga ungu
Telah dijabarkan cara uji parameter untuk angka lempeng total dan parameter Coliform (Koliform) dan Escherichia Coli. Sebagai catatan tambahan, instrumentasi seperti inkubator, Autoklaf untuk sterilisasi, Penangas air (waterbath), Mikroskop ataupun Alat colony counter adalah alat - alat yang sangat esensial untuk uji mikrobiologi. Oleh karena itu, selain perlakuan uji, bahan dan reagen, analis juga perlu melakukan pengadaan dan/atau perawatan terhadap alat - alat yang telah disebutkan.
Referensi :
Badan Standardisasi Nasional. 2023. Standar Nasional Indonesia Nomor 3553 Tahun 2023 tentang “Air Mineral”
Badan Standardisasi Nasional. 2015. Standar Nasional Indonesia Nomor 3554 Tahun 2015 tentang “Cara Uji Air Minum Dalam Kemasan”
Li, Daoliang dan Shuanglyin Liu. 2019. Chapter 12 - Water Quality Monitoring in Aquaculture, Basis, Technology and Case Studies Page 303 - 328, https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/B9780128113301000120 diakses pada Tanggal 9 April 2025 Pukul 09.05 WIB
Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. 2023. Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 2 Tahun 2023 tentang Peraturan Pelaksanaan Peraturan Pemerintah Nomor 66 tentang Kesehatan Lingkungan, https://peraturan.bpk.go.id/Details/245563/permenkes-no-2-tahun-2023 diakses pada Tanggal 7 Maret 2025 Pukul 09.30 WIB
Nugroho, Dimas. 2015. Uji Mikrobiologis pada Berbagai Jenis Air Minum. Jakarta : Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah
World Health Organizations. 2024. Guidelines For Drinking-Water Quality, https://www.who.int/publications/i/item/9789240088740 diakses pada Tanggal 7 Maret 2025 Pukul 10.18 WIB
Washington State Departement of Health. Coliform Bacteria in Drinking Water, https://doh.wa.gov/community-and-environment/drinking-water/contaminants/coliform diakses pada Tanggal 9 April 2025 Pukul 15.02 WIB